英文名 AF647-NHS ester
CAS号 407627-60-5
分子量 956.09
分子式 C40H49N3O16S4
熔点 N/A
分子结构与化学特性
AF647 NHS 由 Alexa Fluor 647 荧光核心和 NHS 酯官能团组成。Alexa Fluor 647 是一种远红光荧光染料,激发峰约为650 nm,发射峰约为668 nm。其结构优化后具有高量子产率和显著光稳定性,可在长时间激发条件下维持荧光亮度。NHS酯是一种活化羧基,可特异性与蛋白质、多肽或小分子中的自由氨基形成稳定的酰胺键,保证高效共价偶联。该结合方式不仅高效,而且可最大限度地保持标记分子的生物活性。
光学特性
AF647 NHS 属于远红光荧光染料,激发峰约650 nm,发射峰约668 nm。远红色发射具有穿透能力强、背景自发荧光低的优势,非常适合复杂生物样品的成像。其高量子产率和良好光稳定性确保在显微镜成像、流式细胞仪检测或多色荧光实验中获得稳定、清晰的信号。远红色特性还使 AF647 与蓝色、绿色或橙色荧光染料兼容,实现多通道联合检测。
蛋白质标记
AF647 NHS 可高效标记蛋白质中的赖氨酸残基或其他可用氨基,生成稳定的共价偶联产物。标记后的蛋白质可用于免疫荧光染色、Western blot、ELISA、免疫沉淀及流式细胞分析。红色荧光在多通道实验中具有良好的分辨能力,适合低浓度样品检测。
抗体偶联
AF647 NHS 常用于抗体标记,制备荧光免疫探针或二抗。通过远红光信号,可以进行高灵敏免疫检测,同时降低生物样品自发荧光干扰,提高信噪比。
多肽和小分子标记
AF647 NHS 可与含氨基的多肽或小分子偶联,构建功能性荧光探针,用于分子相互作用研究、受体定位、药物靶点验证及分子追踪实验。其高效率偶联和稳定性保证了实验的可靠性。
活细胞和组织成像
远红光荧光特性使 AF647 NHS 标记分子在活细胞及组织中具有良好的穿透性和低背景荧光。标记蛋白质或探针可用于细胞器定位、蛋白质动力学追踪及活细胞多色成像。
多通道联合检测与高通量分析
AF647 NHS 与其他颜色荧光染料组合,可实现多参数同时检测。在流式细胞分析、荧光显微镜和多色成像中,AF647 常用于构建多通道实验方案,实现复杂生物体系的多指标分析。