FITC-insulin,异硫氰酸酯荧光素-重组人胰岛素的合成方法:氨基反应偶联策略
品牌品牌:FITC-insulin,异硫氰酸酯荧光素-资产重组人胰岛素
1. 功能特性:荧光示踪+降血糖活性的双重优势
荧光示踪特性:FITC出具实时路况、可视化管理的荧光信息,采在生殖上皮细胞系或浅表层企业成相(如胰岛β生殖上皮细胞系、肌肉进行/脂肪含量企业),可探测胰岛素在生殖上皮细胞系内的分布图、基础代谢及与蛋白激酶的双方能力,削减蓝本扰乱,升高信噪比。胰岛素的降血压抗逆性:胰岛素顺利通过与胰岛素蛋白激酶(IR)结合实际实际,系统激活PI3K-Akt数字信号环路,有利于促进匍萄糖集运体(GLUT4)转位至内部膜,会加快匍萄糖摄入(如腿部肌肉、碳水化合物内部)及肝糖原转化成,时抑止肝糖原工业制硝酸和糖异生。箭头后需开展其与IR的结合实际实际业务能力及降低血脂几丁质酶。生物学相溶性:FITC和胰岛素均养家糊口物兼容性问题氧分子,但需验正检测器布局在身上的产生(如FITC会不会松动)、毒素(如暂时蓄积)及对胰岛素化学活化的反应(如符号会不会破环二硫键或多巴胺受体结合在一起位点)。2. 合成方法:氨基反应偶联策略
FITC-Insulin的结合普通用于分块偶联法,重要的流程以下:胰岛素的预治理 :并购重组人胰岛素粉未溶解完于碳酸盐缓存数据液(pH 9.0-9.5),整改密度至1-5 mg/mL,保证 氨基多方面裸露(咸性坏境改善FITC反响有效率)。FITC的碱化与偶联:FITC颗粒熔化分解于DMSO中,慢慢加入适量至胰岛素饱和溶液中,温度闭光搅拌机反响2-4小时英文。FITC的异硫氰酸基团与胰岛素的氨基反响,转变成硫代氨基甲酸酯键。想法式:Insulin-NH₂ + FITC-N=C=S → Insulin-NH-C(=S)-FITC纯化与研究方法:反應迟钝液进行透析(MWCO 3-5 kDa)或反渗透装置(10 kDa cutoff)洗去未反應迟钝的FITC和小团伙副结果,制冷干涩得到了FITC-Insulin碎末。进行太阳光的紫外线-因而光谱了解了解(UV-Vis)(FITC的特点挥发峰495 nm)和荧光光谱了解了解(调动吸光度495 nm,释放出吸光度520 nm)安全验证箭头工作效率,进行SDS-PAGE或质谱(MS)了解胰岛素的团伙量及纯净度。贴心信息提示:仅应用在研发,不可能应用在人体本身实验性!wyh