CY7-MAL,花菁染料CY7-马来酰亚胺的使用方法
产品名称:CY7-MAL,花菁染料CY7-马来酰亚胺的使用方法
的使用策略标志前准备好:关键氧分子补救:蛋白酶质/多肽:确认目的团伙含存在巯基(如半胱氨酸残基)。若巯基被守护(如用TCEP或DTT展现系统二硫键),前须进行脱盐柱或透析祛除展现系统剂。团体/团体:如果需要活团体标注,需选择温暖的发应水平(如低密度、短暂间)以避免出现团体伤到。减慢液选:推介缓解液:PBS(pH 7.4)、HEPES(pH 7.0)或Tris-HCl(pH 7.5),逃避含螯合剂(如EDTA)的缓解液。加剂:可加少量的可挥发高沸点溶剂(如DMSO或DMF,终氧浓度≤5% v/v)加快CY7-MAL的降解度。标签体现:摩尔比:大多数CY7-MAL与要求分子结构的摩尔之比1:1-5:1(大量有机颜料可从而提高标注生产率,但需险遭纯化除掉未不良反应有机颜料)。不起作用管理体系:随时混合型喂养:将CY7-MAL融解于DMSO或DMF(终质量浓度≤10% v/v),注入含要求大分子的缓存数据液中,环境温度孵育3015分钟至2半小时。阴凉运营:CY7对光灵敏,需要在暗处或黄光下展开影响。的反应停止:申请加入巯基外移剂:如N-乙基马来酰亚胺(NEM,1-5 mM)外移未不起作用的巯基,解决副不起作用。纯化前处理:利用脱盐柱或透析避开未现象纺织染料和小分子结构溶物。纯化与查证:纯化方法步骤:透析:适用性于大原子核(如膳食纤维质)的纯化,出掉未作用有机染料和小原子核不溶物。凝露滤出:便用Superdex 75或200柱隔离标记符号产品与未反响有机染料。HPLC:反相HPLC(如C18柱)可高拆分标注多肽或小原子核。检验工艺:荧光检查:经过荧光分光光度计或抑菌凝胶激光散斑平台认证标注生成物的荧光放射。SDS-PAGE:竞品记高核蛋白质开展电泳定量分析,看荧光条带与高核蛋白条带有无完全一致。质谱:采用MALDI-TOF或ESI-MS核验图标有机物的原子核量变化。和睦显示系统:仅用以研究,无法用以人的身体测试!wyh