CY5.5-Streptavidin,CY5.5标记链霉亲和素的反应条件
CY5.5-Streptavidin,CY5.5标志链霉亲和素的不起作用状况
CY5.5-Streptavidin 是通过将近红外荧光染料 CY5.5 共价标记至链霉亲和素(Streptavidin)分子上的复合物,常用于荧光免疫检测、核酸杂交、蛋白质印迹和体内成像等生物实验中。链霉亲和素具有高度特异性地与生物素(Biotin)结合的能力,而CY5.5染料则提供了近红外荧光信号,二者结合可实现目标分子高灵敏度的可视化检测。
CY5.5 往往以 NHS 酯的表现形式展开装饰。NHS酯活力性高,才能与营养素质中的伯胺基团(主耍來都来自于赖氨酸残基)在一个温和要求下发文件生酰胺键进行连接,达到共价标记图片。CY5.5-Streptavidin 的制作体现要求下面:缓存器装修标准选定:作用通畅在碳酸氢钠缓存器液(NaHCO₃,pH 8.3–8.5)或磷酸缓存器液(PBS,pH 7.8–8.2)中进行。酸碱度的环境有助于赖氨酸的伯胺基去质子化,的提升亲核活性氧。避开用有伯胺类物(如Tris缓存器液),如不与NHS酯市场竞争作用。淀粉酶质氧化还原电位:链霉亲和素溶剂氧化还原电位有效控制在1–5 mg/mL比较特别适合。淀粉酶质过稀不好的于作用利用率,氧化还原电位过高则有可能造成颜料不光滑结合在一起。CY5.5-NHS 酯的安排:CY5.5-NHS酯需现配现配,常常溶水无水DMSO或DMF中,有机废气浓度值约为1–10 mM。应较慢下载蛋清盐溶液中,预防轮廓线有机废气浓度值过高会导致蛋清聚合或变形。摩尔比率保持:染色剂与核球蛋白的摩尔比率必设定在3:1到10:1间,按照比率需标准需要的箭头图片系数与荧光強度可以调节。神经太过紧绷箭头图片概率使得核球蛋白构象提升或能力损失。反馈体温与时段:反馈在背光必要条件下,于制冷(20–25°C)下做出,保持30分鐘到2h。背光操作步骤以避免CY5.5光降解,达到其荧光吸附性。终结与纯化:不良现象终结后,一般来说加入到甘氨酸或酒精胺终结稳定度NHS酯不良现象。那么采用凝胶的作用活性炭过滤(如 Sephadex G-25)或反渗透装置离心力(10–30 kDa MWCO)我们要除自由纺织染料与小氧分子不溶物。质理把控好与定量分折:纯化后在使用紫外光-内见分光光度计查测释放峰(CY5.5的λmax ~675 nm)并且淀粉酶释放(280 nm),计算D/P比(Dye to Protein Ratio),并按照SDS-PAGE、电泳与质谱分折确保淀粉酶完整详细性与标签速度。存放水平:CY5.5-Streptavidin 可在4°C下临时性包存,长时间意见和建议进入甘油(20%)或冻干后闭光包存于–20°C下例。指出指出,CY5.5-Streptavidin 的标注的过程 需按照严格设定反馈pH、体温、时期和纺织染料的比例,以确定荧光比强度与球蛋白用途权衡,是实现多用途荧光微生物探头的至关重要步奏的一个。产品名称:CY5.5-Streptavidin,CY5.5标出链霉亲和素
溶解度:95%+遗传性状:气体或液态体存储必要条件:-20°C低温干燥阴凉维持包裝尺寸规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需出具)厂:杏彩体育平台 生物技术仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.06.23