FITC-NHS,异硫氰酸酯荧光素-活性酯的优势与局限性
產产品名字大全称:FITC-NHS,异硫氰酸酯荧光素-催化活性酯的优势与劣势与片面性的只性一、提前准备问题1. 闭光进行操作FITC-NHS对光刺激性,全部过程必须要在暗处或黄光下对其进行,避免荧光淬灭。2. pH调整发应缓解液pH应保证在7.2-7.5(PBS)或8.5-9.0(CBS),以免强酸水平致使NHS酯核蛋白质水解或强碱水平致使核蛋白性质发生变化。3. 标志度调节无限标注图片可以修饰最终阶段目标氧分子式结构的灵活性位点(如抵抗能力抗原紧密联系位点),需借助预实验室升级优化FITC-NHS与最终阶段目标氧分子式结构的摩尔比(一般是标注图片度为1-5 FITC/氧分子式结构)。4. 含量认证凭借HPLC或SDS-PAGE核对标志副产品含量,尽量不要未表现FITC-NHS干预检测(FITC-NHS在280 nm无汲取,可凭借A₄₉₅/A₂₈₀相对分子质量测试含量,一流副产品相对分子质量>0.5)。5. 补充状态FITC-NHS需预包装后-20℃冻存,防范反反复复冻融(每天冻融可能会引起亲水性伤害10%-20%);箭头物质需预包装后-80℃永久保存,防范荧光淬灭。二、长处与特殊性性胜机高特喜欢的人:NHS酯与氨基发生反应有着的高度的可选择性,以减少非特喜欢的人配合。强荧光电磁波:FITC量子成品率高(约0.9),适宜低丰度靶分子结构检查测量。运行简约:作用情况清新(4℃,pH 7.4),不用办理错综复杂机 。限制性光淬灭:FITC荧光易受太阳光照度影响到,需严谨调控实验室太阳光照度水平。pH刺激性性:NHS酯在pH>8.5时易淀粉水解,需系统优化缓解液pH。标识度上限:过度的标识很有可能后果对象团伙抗逆性,需发展荧光效果与实用功能永久保存。溫馨提示信息:仅应用在教学科研,不可以应用在人的身体實驗!wyh