FITC-NHS,异硫氰酸酯荧光素-活性酯的优势与局限性
物料命名:FITC-NHS,异硫氰酸酯荧光素-生物酯的的优势与限制性一、要注意装修细节1. 阴凉操作的FITC-NHS对光明感,因此环节必须暗处或黄光下做,解决荧光淬灭。2. pH有效控制作用加载液pH应始终维持在7.2-7.5(PBS)或8.5-9.0(CBS),防止出现含酸性必要要求诱发NHS酯蛋白酶质水解或含碱必要要求诱发蛋白酶退行。3. 标记图片度管控太过标识可能性遮盖住的的目标原子核的抗逆性位点(如抗体阳性抗原紧密结合位点),需在预调查SEOFITC-NHS与的的目标原子核的摩尔比(一般性标识度为1-5 FITC/原子核)。4. 色度认可根据HPLC或SDS-PAGE确定标示化合物溶解度,逃避未发应FITC-NHS打扰科学实验(FITC-NHS在280 nm无释放,可根据A₄₉₅/A₂₈₀相对分子质量考核溶解度,优异化合物相对分子质量>0.5)。5. 处理情况FITC-NHS需包装后-20℃冻存,防止出现出现冻融(每次在冻融应该诱发吸附性失去10%-20%);标志乙酰乙酸需包装后-80℃保存文档,防止出现荧光淬灭。二、强势与特殊性性长处高特情人:NHS酯与氨基现象都具有较高可选择性,下降非特情人运用。强荧光无线信号:FITC量子产出率高(约0.9),可以低丰度靶原子核论文检测。运营简单便捷:反馈情况温顺(4℃,pH 7.4),就不需要僵化的设备。片面性光淬灭:FITC荧光易受照射干扰,需严苛调控实验性照射生活条件。pH敏感度性:NHS酯在pH>8.5时易电离,需优化提升抗震液pH。标出度限定:过早标出能够危害方向团伙活性酶,需平横荧光抗压强度与技能保持。祥和友情提示:仅使适用于科研管理,无法使适用于身体实验英文!wyh