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Biotin-cRGD,生物素-环肽的合成方法
发布时间:2025-08-04     作者:wyh   分享到:
的产各称称:Biotin-cRGD,微生物素-环肽的合出具体方法结合方式(1)固相炼制法(SPPS)步1:合出cRGD多肽光敏树脂的选择:Rink Amide硅橡胶:转化PC版酰胺(c(RGDfK)-NH₂)。Wang硅胶粘合剂:添加电脑端羧酸(c(RGDfK)-COOH)。酪氨酸偶联:由小到大偶联Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-D-Phe-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH等。环化:在赖氨酸侧链氨基与天冬氨酸羧基间生成内酰胺键(在使用HATU/DIPEA碱化)。切割机硅橡胶:TFA/TIS/H2O(95:2.5:2.5)锯开,收获c(RGDfK)-NH₂或c(RGDfK)-COOH。过程2:怪物素体现策略1:间接体现cRGD的氨基菌物素羧酸(Biotin-COOH)与c(RGDfK)-NH₂能够EDC/NHS碱化不起作用:水解Biotin-COOH(1 eq)和EDC(1.5 eq)在DMF中,温度搅拌装置30分种。成为NHS(1.5 eq),以后的反应30min。下载c(RGDfK)-NH₂(1 eq),pH 7.5-8.0,环境温度不起作用隔夜。HPLC纯化,到Biotin-c(RGDfK)。方式方法2:能够 联接臂体现先合成视频Biotin-PEG₄-NHS(金融业可购),再与c(RGDfK)-NH₂发应:溶解性Biotin-PEG₄-NHS(1 eq)和c(RGDfK)-NH₂(1.2 eq)在PBS(pH 7.4)中。室内温度发生反应2分钟,HPLC纯化。(2)液质人工法适用范围包括小产值合成视频或有难度遮盖:事前结合动物素-PEG₄-COOH,再采用EDC/NHS与c(RGDfK)-NH₂偶联。资源优势:可正确掌握反應必要条件(如pH、温度因素),变少副有机物。(3)纯化与定量分析纯化:反相HPLC(C18柱):离心分离未发应的生物技术素或cRGD。原子核结构筛层析(如Sephadex G-15):消除小原子核结构沉淀物。研究方法:质谱(MS):核实团伙结构量(如Biotin-c(RGDfK)的策略团伙结构量≈1200 Da)。HPLC调取时段:与未体现cRGD可比性,证实含量(>95%)。生物技术素催化活性检查:确认ELISA或荧光极化实验性校验与链霉亲和素的结合起来程度。温情建议:仅用做研发,不允许用做体内實驗!wyh

Biotin-cRGD,生物素-环肽

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