Cy3-dCTP，花菁类荧光染剂CY3共价衔接至脱氧胞苷三磷酸的表现具体步骤

Cy3-dCTP 是将花菁类荧光染料 CY3 共价连接至脱氧胞苷三磷酸（dCTP）分子上的荧光核苷酸衍生物，应用于分子生物学实验，如荧光原位杂交（FISH）、荧光PCR、DNA合成标记、测序等。该标记形式通过在碱基或糖环结构上引入荧光团，实现对核酸合成或模板识别过程的可视化分析。

CY3-dCTP 的结合一般 用到核苷酸突显对策，在维持 dCTP 三磷酸骨架完正性的的基础上，转化有一个连接方式基团（如氨基烷基链或氨基酯链）算作染剂偶联位点。较常用的对策是在 dCTP 的 5-位碱基上转化氨基链（如 aminoallyl-dCTP），再采用与 CY3-NHS 酯展开中后期突显构成酰胺键。到底影响部骤一下：合并氨基突显核苷酸：以脱氧胞苷为初始物，根据在其C5位产生一款 氨基烷基侧链，得以 aminoallyl-dCTP。该在期间体既确保核苷酸本身的碱基搭配力量，又产生一款 活泼开朗伯胺，用来售后记号。CY3-NHS 酯制法与产甲烷：CY3确认与N-羟基虎珀酰亚胺发生表现确立NHS活酯，使染剂遵循与胺发生表现的作用。该酯在干热有机的石油醚（如DMSO）中配成，以保护其活性酶类。偶联生理生理反应：将 aminoallyl-dCTP 溶解度于碳酸盐缓解液（pH 8.5），填加少量 CY3-NHS 酯（一般性以1.2–1.5倍摩尔量），在阴凉前提下平稳生理生理反应 2–4 小，合成稳定性的 CY3-dCTP。整体的时候需认真杜绝轻金属阴阳离子废弃物和强脱色坏境，防范止核苷酸降解塑料。纯化具体步骤：影响后实用化合物调换色谱或反相HPLC分割纯化，的还原未影响纺织染料、储存盐及副代谢物。纯品可进十步冻干手机截图，事关其三磷酸设备构造保持稳定。查验与放置：凭借质谱、核磁震荡（NMR）及UV紫外线-明显可见的光谱图（UV-Vis）完成型式检验，验收荧光团顺利完成导入。CY3-dCTP 需速冻遮光放置（-20°C以內），以维护荧光抗压强度及核苷酸增强性。该标上核苷酸可被DNA整合酶判别并掺进新获得的链中，删去其荧光成分，适于于高灵敏性度的分子结构侦测實驗，包括的實驗室应该用意义。

产品名称：Cy3-dCTP，花菁类荧光颜料CY3共价连结至脱氧胞苷三磷酸

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