英文名称:Ac-Asp-Glu-Val-Asp-AFC
中文名称:乙酰-天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸-7-氨基-4-三氟甲基香豆素
乙酰-天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸-7-氨基-4-三氟甲基香豆素(Ac-Asp-Glu-Val-Asp-AFC,代称Ac-DEVD-AFC)就是种荧光标上的四肽底物,专业级于检侧半胱天冬酶-3(Caspase-3)及Caspase-7的酶灵活性。其机构中,N端乙酰基(Ac)严防肽链降解塑料,天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸(DEVD)编码序列为Caspase-3/7的特异形切开工作位点,东东助手7-氨基-4-三氟甲基香豆素(AFC)对于荧光基团,在未被切开工作时若共轭机构荧光基础薄弱,酶切后发挥氧化钙含量AFC,其荧光的强度(激励光波光的波长400 nm,导弹光波光的波长505 nm)差异性不断增强,可经由荧光分光光度计或纳米纤维板浏览器酶联免疫法检侧。Caspase-3/7是体細胞核凋亡完成关键时期的核心理念蛋清酶,其可溶性变化无常可表明凋亡移动信号信号通路的启用情形。Ac-DEVD-AFC经过提供了高迅敏度的荧光探测技术手段,称为调查体細胞核凋亡新机制的最重要平台。比如,在周围脑神经退行性常见疾病建模中,可经过侧量脑结构匀浆中Caspase-3/7对Ac-DEVD-AFC的打孔可溶性,评定周围脑神经元凋亡数量;在中药毒素评定中,该底物适用于探测单质是不是也经过促进凋亡诱发体細胞核消失。Ac-DEVD-AFC的采用需SEO优化实验所能力以增长精准的性。列如,表现缓冲器液需是指合适有机废气浓度值的DTT以保护酶生物,同一时间不要过高有机废气浓度值电磁波辐射荧光查重;表现平均温度(大多数37℃)及早间需依照范例性质调节,以保证 荧光电磁波与酶生物呈平滑干系。凡此种种,需采用增加炎症因子聊天控溶液剂(如Ac-DEVD-CHO)查证电磁波炎症因子聊天,消除其它血清酶的电磁波辐射。当今,Ac-DEVD-AFC已多使用于受损细胞生物学、药剂学学及问题学的研究,为看法凋亡重要性问题的原子新机制提拱了核心高技术维持。

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