FITC-HA-Biotin,荧光素-透明质酸-生物素的制备方法
物料名号:FITC-HA-Biotin,荧光素-透明化质酸-生物学素的提纯办法
制备方法
方法1:初步分解法
HA的滋养将HA(氧分子量10-100 kDa)可溶性高,溶于水的于MES加载液(pH 6.0),入驻EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺)和NHS(N-羟基虎珀酰亚胺),碱化HA的羧基(-COOH),绘制NHS酯中间商体。FITC标注将FITC溶解出来于DMSO,相对比较缓慢滴入至活性后的HA悬浊液中,高温遮光反响4几小时,依据透析(MWCO 3.5 kDa)避开未反响的FITC,拥有FITC-HA。微生物素体现将FITC-HA分解于PBS(pH 7.4),融入动物素-NHS酯(或动物素-PEG-NHS),反响2小时左右,用透析或疑胶滤出纯化,以后生成物为FITC-HA-Biotin。方法2:点化学上的法(更高效)
炔烃掩盖HA将HA与炔丙基胺发应,传入炔烃基团(可以通过酰胺键拼接)。叠氮化FITC和生物体素组成叠氮基-FITC(如FITC-PEG-N₃)和叠氮基-菌物素(如Biotin-PEG-N₃)。单击偶联在CuSO₄/抗坏血酸钠催化氧化下,将炔烃-HA与叠氮基-FITC和叠氮基-生物技术素反应迟钝,合成FITC-HA-Biotin,可以通过HPLC纯化,产出率>85%。自己集团公司可提供了有关的私人定制的产品,此事需,请在线咨询,谢谢您!