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mPEG-DBCO 促进 Fab PD-L1-IH18 PEG化及纯度评估
发布时间:2025-07-17     作者:kx   分享到:
文章:的使用碳原子导航定位的三维显像剂对*性*PD-L1*体导航定位参与多大尺度三维显像链接转换://link.springer.com/article/10.1186/s12951-022-01272-5小说作家:艾里斯·M·哈格曼斯,彼得·J·维尔斯特拉卡斯·施图滕Janneke DM 莫尔肯波尔-库南,杜科·范·达伦马丁·特尔·比斯特约店翰·MS ·范德舒特奥尔加·伊琳娜马丁·戈特哈特卡尔·G·菲格多尔费伦茨·A·舍伦,桑德拉·赫斯坎普马丁·维尔多斯节选:FabPD-L1-IH18 的聚乙二醇化和纯化将 10 Eq. (94.0 nmol) 的 mPEG-DBCO (Click Chemistry Agents, A120) 的 PBS (3.33 mM) 水氢氧化钠溶液立即调用到 Fab PD-L1-IH18 的 PBS 水氢氧化钠溶液 (470 µg, 9.40 nmol, 3.0 mg/mL) 中,使 Fab PD-L1-IH18 与 20 kDa PEG 偶联。将该混杂物在 37 °C 下孵育 90 半小时,的采用的 Amicon Ultra-4 抽滤实行过滤设备安装 (MWCO 10 kDa (Merck, UFC801024)) 与 0.02 M 乙酸盐降低液 (pH 4.5,降低液 A) 实行降低液置换,最后的采用的 1 mL HiTrap SP FF (GE Lifesciences, 17505401) 阳亚铁离子置换柱在 NGC Quest Plus Bio-Rad 模式先以 0.5 mL/min 的操控流速实行纯化。用降低液 A 稳定 8 个柱重量后,填加降低液 A 中 0.5 M NaCl 的平滑系数(30 个柱重量中 0-0.5 M NaCl)。聚乙二醇化 Fab PD-L1-IH18 通常情况下在约 8 个柱重量(0.15 M NaCl)后洗刷。的采用的 Amicon Ultra-4 抽滤 10 kDa MWCO 实行过滤设备安装(Merck,UFC 801024)和无菌操作 PBS 是降低液原谅我真的喝醉了 因为我真的想你的 一不小心 我知道这样不应该 对你泰国依赖 包含有纯化化合物的级分,并按照 12% SDS-PAGE 实行定量具体分析。的采用的 Nanodrop 判断的方式溶液浓度。按照的采用的 BCA 定量具体分析(Pierce BCA 蛋白酶酶质判断的方式微生物培养基盒,ThermoFisher Scientific)安全验证该的方式的能信性。如上表明,按照实行密度计算公式判断的方式法来细化蛋白酶酶质含量。含量 Fab PD-L1-IH18-PEG 20kDa  = 89%。

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