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发布时间:2025-07-17     作者:zyl   分享到:

FITC(Fluorescein Isothiocyanate)是一种广泛使用的荧光染料,是荧光素(Fluorescein)衍生的异硫氰酸酯活性化合物,具有良好的荧光性质和反应活性,常用于标记蛋白质、多肽、抗体、氨基寡核苷酸等含胺类生物分子。

FITC 一种蓝色荧光活性染料,在激活吸光度约为495 nm(蓝光激活)时可发射点520–530 nm的蓝色荧光,存在高量子成品率和优异的显像评测度,是荧光标记图片和显像研究方向的经典爱情生产工具分子式。

常用名荧光素

英文名fluorescein

CAS号518-45-6

分子量332.30600

分子式C20H12O5

熔点N/A

FITC

结构特性

FITC是荧光素的异硫氰酸酯延伸物,进来异硫氰酸酯基团(–N=C=S)诠释其与伯胺(–NH₂)作用的力。这个作用一般性在酸碱性状况(pH 8.0~9.0)下来,可与氨基型成稳定的的硫脲键,然后推动分子结构的共价标签。FITC有三种异构体:5-FITC 和 6-FITC,中仅5-FITC是经常用的异构体,也常作基准采血管销售额。商业服务上保证的“FITC”平常是5-FITC和6-FITC的混后物。


反应活性与标记机制

FITC中的异硫氰酸酯基团可与伯胺类原子发展反响,在一个温和条件下出现动态平衡的硫脲键。这使其形成标注蛋清质、抗原和寡核苷酸的好的选择。该反响部骤简单方便更高效,可用减慢液为碳酸氢盐减慢液(pH 8.3)或磷酸二氢钠减慢液(PBS,调高至偏碱)。标出结束后,一般需用透析、凝露滤过或HPLC等途径清掉未反應的FITC存在颜料,以提高背景图案信号灯。


主要应用领域

免疫荧光染色(Immunofluorescence, IF)
FITC可用于标记抗体,用于检测细胞或组织中的特定靶标。由于其绿色荧光信号清晰明亮,可被多种荧光显微镜检测系统识别。

流式细胞术(Flow Cytometry, FACS)
FITC标记抗体广泛用于流式细胞术中,用于检测细胞表面或胞内蛋白,便于实现细胞亚群分析或细胞活性评估。

蛋白质/多肽标记
FITC常用于标记酶、激素、受体、细胞穿膜肽等,用于追踪其生物分布和作用机制。

细胞追踪和示踪实验
通过FITC标记的物质可用于研究细胞的吞噬、摄取、转运、跨膜过程等。

荧光探针和传感器构建
FITC经常用于合成荧光比率探针或用于检测离子、pH、酶活性的传感系统。


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