Cy5-DOPE在细胞膜荧光示踪中的应用与特性分析
论文参考文献:体现了PD-1膜核蛋白的融入交织神经细胞外囊泡采用胞质物货车辆地址://www.mdpi.com/2072-6694/14/11/2635原作者:石川拉贺†奥西德,吉田章介‡,泽田新一,佐佐木义弘和秋吉一成*节选:原材料杆状病毒样本表达出软件系统中常会用的秋粘虫Spodoptera frugiperda的Sf9害虫组织膜系购自Invitrogen子公司(韩国加利福尼亚州沃尔瑟姆)。HeLa组织膜购自JCRB Bank(岛国研究探讨微生物信息贮藏机构,岛国大阪)。 1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱 (DOPC)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸- L -丝氨酸 (DOPS)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸工业甲醇胺- N -(菁 5) (Cy5-DOPE)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸工业甲醇胺- N -(7-硝基-2-1,3-苯并恶二唑-4-基) (NBD-DOPE) 和 1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸工业甲醇胺- N -(丽丝胺罗丹明 B 磺酰基) (Rho-DOPE) 均购自 Avanti Polar Lipids (Alabaster, AL, USA)。脂质制度备将DOPC、DOPS、NBD-DOPE、Rho-DOPE和Cy5-DOPE以各种不同的摩尔比在窗玻璃微管内的氯仿中混合式。在流动量的氩气下蒸发器萃取剂,形成了脂质膜。将膜放于真空体太干器中留宿,以非常祛除氯仿。倒入250 µL缓冲器液(20 mM CH3COOH/CH3COONa(pH 4.5)或10 mM Tris-HCl(pH 7.5))使膜水合,并在27 °C下孵育留宿。适用徵型挤压机(Avanti Polar Lipids)将漂浮液挤压100 nm直径的聚碳酸膜。适用磷脂C检测(Wako,日本这个国家大阪)在线测量脂质盐溶液浓度。简来说 之,磷脂酶D和胆碱脱色酶从磷脂产品的样件中发生了过脱色氢。发生了的过脱色氢在过脱色物酶的用处下驱动N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺(DAOS)与4-氨基安替比林发生了缩合影响,形成天蓝色染剂,能够 法测该染剂的吸光度,得以法测产品的样件中的磷脂盐溶液浓度。