CY7-SA 荧光标记链霉亲和素偶联物 Cy7-Streptavidin Conjugate的制备方法
CY7-SA(链霉亲和素)偶联物制备方法
中文名称:CY7标记链霉亲和素
英文名称:Cy7-Streptavidin Conjugate
别名:Cy7-SA偶联物、近红外染料标记链霉亲和素、赛妥染料标记链霉亲和素
供应商:西安杏彩体育平台 生物科技有限公司
用途:科研
一、原料与基本原理:
链霉亲和素(Streptavidin, SA):一种四聚体蛋白,具有很强的与生物素结合能力,是常用的生物素化检测系统核心分子;
Cy7-NHS(活性酯型近红外荧光染料):N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯形式的Cy7能高效与蛋白质中的赖氨酸残基反应,形成稳定的酰胺键;
缓冲液:如PBS(pH 7.4)或0.1M碳酸盐缓冲液(pH 8.3)可提供稳定环境。
二、合成步骤:
材料准备
将SA蛋白质不能溶解PBS响应液中,盐浓度一样 调控在1–2 mg/mL; Cy7-NHS染剂经常以DMSO为相转移催化剂水解,浓硫酸浓度约为1–10 mM备品。共轭反应
按磨尔比约1:5~1:10(SA : Cy7-NHS)相对比较缓慢将活性染料饱和稀硫酸中滴加至血清饱和稀硫酸中; 的作用网络体系在阴凉的条件下,于恒温孵育0.5–2小的时候,悄悄均匀搅拌推进的作用;为以防止出现非活性朋友想法,pH提升在7.5–8.5,防止出现室温或极致pH。纯化处理
现象结束后后,用透析袋(10 kDa)透析清掉未紧密结合纺织染料; 或的使用凝胶的作用过滤系统层析(如Sephadex G-25)通过纯化,抽取荧光峰相对应的淀粉酶成分。质量控制与储存
检验蛋白质溶液浓度(280 nm)和荧光吸收率峰(Cy7:约750 nm)认定偶联高效率; 结果英文货物闭光灌装于pH 7.4 PBS中,-20°C闭光另存。
三、应用与优势:
应用:常用于近红外荧光成像、生物素标记分子检测、免疫组化、电泳显色、蛋白质追踪和体内荧光成像等;
优势:
反射可见光波长约775 nm,组织机构可破坏力强;与海洋生物素高亲和搭配,非特异朋友强;可与荧光素、Cy3等有机染料组合搭配用以重量检测工具。
关于我们:
昆明杏彩体育平台 海洋怪物具备的荧光标识保障于扶持糖物理、球高蛋白、多肽、免疫抗体、核酸及nm的材料等四种海洋怪物碳原子的荧光化绘制。可具备四种荧光测试检测器(如FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor系列产品、ICG等),跟据利用环境(免疫印迹上皮细胞核、共专注、活体激光散斑等)挑选适合的光的波长及标识模式。保障于涉及到标识的反应、纯化、标识率监测及性能查验,事关碳原子催化活性和警报刚度。应于上皮细胞核追综、碳原子激光散斑、靶向疗法查验等研究分析,也可具备开发荧光刚度、pH出错或近红外测试检测器功效化保障于。以上资料由小编zhn提供,仅用于科研
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