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杏彩体育平台 提供核酸染料SYBR Green I(163795-75-3)荧光染料的简介
发布时间:2021-05-18     作者:zzj   分享到:

核酸染色剂SYBR Green I

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本品用DMSO熔化分解,这是由于DMSO融点是18.3℃,适用前请移动到到温度积极熔化分解。

进行步驟(仅限于对比):

一、胶染法(用法说明通EB)( 举荐方式,见图1)

1、制胶时放入SYBR Green I 核酸纺织染料。制冷胶到 50℃左古,每100ml胶中放入1-3µl

SYBR Green I核酸有机染料(见图 1)。

2、准时规方式采取电泳必须。

3、用红外光谱疑胶的作用电子散射仪或看不见光电子散射仪测量。蓝光可穿过波璃,测量聚炳烯酰胺疑胶的作用时,

可可以直接将托有凝胶的作用的夹层玻璃平皿放在可以看到光散射仪内检测。

须得需要注意的是:此的办法脱色能精确确立电影片段分子结构量且含量较少。1ml 染剂能做 1000 块10 ml 胶,一块胶点50个样,可做50000次。

二、点染法(见图3)

1、该技巧合适琼脂糖妇科妇科凝胶电泳和PAGE妇科妇科凝胶电泳。

2、本职工作液的配好的凉茶:电量泳缓存液将10000×的SYBR Green I 调制100倍,就是SYBR Green

I 工做中液。SYBR Green I 工做中液能置2~8℃保留一些月往上, 高浓液在-20℃保留几个月。

3、制胶:按平时措施制胶,包涵什么纺织染料。

4、打样定制脱色:向研究分析打样定制内加入SYBR Green I 事情液和载样缓解液,空调温度安置107分钟,

使SYBR Green I 与检样中DNA积极运用。SYBR Green I 运行液加如量为总上样量的1/5~

1/10。

5、DNA Marker固色:将5μL DNA Marker、5μL DNA Marker就稀释液和1μL SYBR Green

I 事业液混匀,环境温度摆放在4分,使SYBR Green I 与DNA有力联系。

6、上样、电泳:按通常方法。用红外光谱凝胶的作用电子散射仪或看得见光电子散射仪监测。蓝光可映出玻

璃,测量聚乙烯酰胺抑菌疑胶时,可可以将托有抑菌疑胶的玻离平皿放置内见光散射仪内测量。

要注意:用点染法有机染料时,有机染料的使用量少。基本上点另一个样进入 1µL 如要,就能够

用到 10000 次, 但大精彩片段稍有时滞原因,要是必须要 更精准敲定团伙量(与Marker比较),提案选择胶染法。

三、泡染法

1、都按照常见做法展开制胶,但其中没有任意颜料。

2、用 pH 7.0 - 8.5 的储存液(如:TAE, TBE),明确 1﹕1000 的此例摇匀SYBR Green

I 核酸颜料,混匀,制做染色剂溶剂。

3、将着色溶剂装好的pe塑料烧杯中,放置抑菌凝胶,用铝泊等遮起来烧杯使颜料遮光。室

温振荡器印染 10-30 30分钟,着色期限因抑菌凝胶的作用溶液浓度和壁厚而定。PP酰胺抑菌凝胶的作用直 接在玻璃窗平

皿上刺绣,将配好的兑水硫酸铜溶液硫酸铜溶液悄悄地倒在胶板上,让兑水硫酸铜溶液液平均地覆 盖一部分胶板,并染色剂 30

钟头。窗户钢化玻璃平皿肯定事前經過硅烷化稀硫酸清理(应对染剂吸出在窗户钢化玻璃外壁上)。

4、用UV紫外线抑菌凝胶的作用散射仪或屏蔽光散射仪监测。蓝光可互动交流磨砂玻璃,监测pp聚丙烯酰胺抑菌凝胶的作用时,

可随便将托有凝胶的作用的玻璃钢平皿倒出可以说光散射仪内探测。

想要注意力的是:用泡染方式 脱色时,能够 确认核酸片断原子核量。只是这三种方式 中染色剂的使用量的。

类型着色手段优点和缺点较好:

image.pngimage.png

放置状况:2-8℃阴凉粗糙可存储24个月大

考虑相关事宜:

1、 Sybr Green 核酸活性颜料图纸点染方案中,电泳不可以少于 2 几小时,进而核酸活性颜料从 DNA/RNA 上拆分而来,行成弥团状条带。

2、用点染方式方法脱色时,条带稍有较慢原因,假如可以确认片断原子量(和 Marker 比较),最好用胶染法和泡染法。

3、常规性用酒悠长岁月中核酸进程中,SYBR Green I 核酸颜料也可以完全从核酸上掉。

4、DNA电泳请选SYBR Green I 颜料,RNA 电泳请选SYBR Green II颜料,两种类型颜料不通用版。

5、SYBR Green I 核酸颜料对窗户玻璃和非pe塑料原材料有着肯定亲驱动力。建议大家在溶解稀释、存贮、染 色等使用的的过程 连用pe塑料类容器等。

可能加Orange Red 用作图标. pH值在7.5-8.3区间内,无需微波电加热电加热,注入热胶的室温不低于50度。


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