SYBR Green I 荧光活性染料的应用场境和红颜色是些什么?
SYBR Green I 有的是种普遍于大分子生物学中的蓝色荧光核酸染色剂,能够与双链DNA(dsDNA)特异形搭配并开展其荧光挠度,经常用到于 实时交通荧光一定量PCR(qPCR)、琼脂糖妇科凝胶电泳染色法、DNA参考值查重等。
基础的信息
名稱:SYBR Green I
导弹发射字体颜色:蓝色荧光
调动光波长(Excitation):约 497 nm
发光波波长(Emission):约 520 nm
荧光资料:与dsDNA紧密联系后荧光增进高于1000倍
组成部分:为非共价搭配小分子式染剂,更具疏水溶性吡啶组成部分,可放双旋螺组成部分中
使用画面
实时路况荧光定量分析PCR(qPCR)
SYBR Green I在PCR测序整个过程中不停与新提炼的双链DNA联系,得以同部监测技术荧光比强度,造成增加有机物的量。
竞争优势:作业简单化、成本价廉、需用于丰富的引物对
优缺点:特女性朋友倒不如TaqMan电极,这是因为SYBR Green没法分辩特异测序或非特异测序(如引物二聚体)
琼脂糖妇科凝胶上色
可当为代换溴化乙锭(EB)的低毒DNA颜料,荧光抗拉强度高,很安全与否更佳
一般在预染或泳后印染环节动用
DNA一定量在线检测
在与规则曲线拟合筛选,能作于高速 测定方法DNA溶液浓度
重视特别注意
特男人情况:SYBR Green I 主要与双链DNA结合起来就能放光,于是也许 会对非特异有机物(如引物二聚体)形成无线信号电磁干扰。
高有机废气浓度调节现象:大量的SYBR Green概率会抑制性PCR响应,觉得运用厂家直销安利盐浓度(一般而言为1×办公浓硫酸浓度)。
不实主要用于RNA进行验测,除非说先进性行变换录。
闭光存为:对光敏感脆弱,应在闭光、地温(平常为-20°C)条件下上传。
✅ 显著优点
选择便宜,兼容好
代价大于TaqMan电极类有机染料
与几乎数qPCR网上平台兼容
可大量用作常规的PCR和电泳分折
缺欠
对非特喜欢的人增加敏感度
无非用以丰富PCR检则
难于差别有差异精彩片段大大小小的产品
荧光降钙素原检测PCR或核酸电泳实验室,SYBR Green I 有的是个所用且效率的器具。必须要升高特情人时,意见与建议依照熔解直线探讨或考虑到食用特情人电极(如TaqMan)。