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β环糊精修饰环形核酸适体(cb-apt-βCD)用于增强功能蛋白递送研究
发布时间:2021-04-15     作者:axc   分享到:

环形核酸适体(cb-apt)是一类化学工程的适配体,具有优良的稳定性和分子识别能力,但是它在方面的应用依然受到挑战。

我们设计了一种β环糊精修饰的环形核酸适体(cb-apt-βCD),它与分子剂通过主客体化学的超分子相互作用,实现细胞内货物的靶向递送。**将分子容器β环糊精,共轭到单链sgc8核酸适配体上(靶向细胞表面的蛋白质酪氨酸激酶(PTK7));接着用一个互补的单链进行环化形成cb-apt-βCD。与单体核酸适体相比,这种超分子系统具有高的血清稳定性且能增强细胞内货物的传递效率。这种环形核酸适体运载绿色荧光蛋白(GFP)的效率高达80%,运载的毒性蛋白-皂草素能细胞的生长。

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图1  cb-apt-βCD的合成路径、与金刚烷修饰的蛋白之间的超分子相互作用及其介导的增强蛋白递送的示意图。**将分子容器β环糊精,共轭到单链sgc8核酸适配体上;接着用一个互补的单链进行环化形成cb-apt-βCD。其不仅能保持环形核酸适体高度的血清稳定性,还能封装疏水性的小分子或者金刚烷修饰的蛋白,形成一个超分子系统,增强细胞内的递送。

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图2  依据DBCO共轭和无铜超链接反应迟钝分解β环糊精呈现的单链核酸适体。依据色谱仪色谱法分离出来纯化得出β环糊精呈现的单链核酸适体;采取同质链杂化联系出现cb-apt-βCD ,可由转性pp聚丙烯酰胺抑菌凝胶电泳表明。

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图3  将GFP对于同一个基本模式球蛋白酶,物理化学掩盖上金刚烷。进行TMR-apt-βCD 和GFP-AdA的荧光震动动能转到工作效率认定书用户间造成包涵络合物。另一方面各种复合材料物在血清中也层面平稳,为生殖细胞内球蛋白酶的运输业给予了质量保障。

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图4  学习cb-apt-βCD介导GFP搭载进受损细胞核膜的情况报告。经由缴光共自动对焦受损细胞核膜激光散斑實驗和免疫印迹剖析實驗证明怎么写该复合材料物能明显的改善GFP的受损细胞核膜递送,且搭载有效率达到了80%。

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图5  研究该复合物运载功能蛋白-皂草素进细胞的情况。通过MTT检测方法证实cb-apt-βCD具有增强功能蛋白运载效率的性质。


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