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β环糊精修饰环形核酸适体(cb-apt-βCD)用于增强功能蛋白递送研究
发布时间:2021-04-15     作者:axc   分享到:

环形核酸适体(cb-apt)是一类化学工程的适配体,具有优良的稳定性和分子识别能力,但是它在方面的应用依然受到挑战。

我们设计了一种β环糊精修饰的环形核酸适体(cb-apt-βCD),它与分子剂通过主客体化学的超分子相互作用,实现细胞内货物的靶向递送。**将分子容器β环糊精,共轭到单链sgc8核酸适配体上(靶向细胞表面的蛋白质酪氨酸激酶(PTK7));接着用一个互补的单链进行环化形成cb-apt-βCD。与单体核酸适体相比,这种超分子系统具有高的血清稳定性且能增强细胞内货物的传递效率。这种环形核酸适体运载绿色荧光蛋白(GFP)的效率高达80%,运载的毒性蛋白-皂草素能细胞的生长。

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图1  cb-apt-βCD的合成路径、与金刚烷修饰的蛋白之间的超分子相互作用及其介导的增强蛋白递送的示意图。**将分子容器β环糊精,共轭到单链sgc8核酸适配体上;接着用一个互补的单链进行环化形成cb-apt-βCD。其不仅能保持环形核酸适体高度的血清稳定性,还能封装疏水性的小分子或者金刚烷修饰的蛋白,形成一个超分子系统,增强细胞内的递送。

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图2  可以依据DBCO共轭和无铜点击量作用转化成β环糊精呈现的单链核酸适体。可以依据色谱仪色谱法分离出来纯化获取β环糊精呈现的单链核酸适体;通过相容链杂化衔接造成cb-apt-βCD ,可由性质发生变化聚丙酰胺疑胶电泳声明。

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图3  将GFP算作某个形式 蛋清,化学工业突显上金刚烷。能够TMR-apt-βCD 和GFP-AdA的荧光震荡能量场转至效果证明怎么写她们期间转变成含盖络合物。之后类似这些复合型物在血清中还能高宽比稳定性高,为组织内蛋清的物流运输给予了保障机制。

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图4  探究cb-apt-βCD介导GFP载运工具进癌细胞系系的原因。经过离子束共对焦癌细胞系系三维成像进行实验操作和流式的分析一下进行实验操作关系证明该pp物能看不出不断增强GFP的癌细胞系系递送,且载运工具速度达80%。

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图5  研究该复合物运载功能蛋白-皂草素进细胞的情况。通过MTT检测方法证实cb-apt-βCD具有增强功能蛋白运载效率的性质。


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