蜜腊酰亚胺酯双吖丙啶（succinimidyl ester diazirine,SDA）无机催化试剂都是类当下的热塑剂，其可将已被声明的氨基表现无机催化与不断创新且**的由于双吖丙啶的光无机催化联系，适用将有效氨基的原子核热塑到可以说任何别的效果基团上。SDA热塑剂其中包括6种化学物质，患者还具有差异的相隔臂长宽，差异的剪接热塑球核蛋清酶的意识各类差异的膜细腻性（有或无导电连接基团）。球核蛋清酶热塑是使用实验球核蛋清酶结构特征各类安稳球核蛋清酶-蛋白酶间接功用的更重要新技术。

在采集蛋白质酶彼此的功效时，双功能化性氨基或巯基化学反应热塑剂可以两个蛋白质酶上的目标碳水化合物基团（随后，赖氨酸或半胱氨酸）具应适当的高度。SDA热塑剂借助采用氨基生理反应化学活化的N-羟基蜜腊酰亚胺酯（NHS ester）对一些球蛋白质开展相关标注，但是运行UV太阳光线纯化将双吖丙啶化学交连于**种球蛋白质的随意氨基侧链或肽段骨地上，关键在于避只开上述规定。根据双吖丙啶的光化学交连剂较根据苯基叠氮化物的光化学交连剂具更好的的光动态平衡性，然而容易被长波UV太阳光光（330-370nm）滋养。

N-羟基虎珀酰亚胺酯双吖丙啶(NHS–ester diazirine) 研究物（SDA，LC-SDA 和SDAD ）少了感应起电基团，为此兼备膜很透亮性。此属性使其主要代替代替生殖细胞内和膜内交连。反，Sulfo–SDA，Sulfo–LC–SDA 和Sulfo–SDAD 具有刺激性带负带电粒子的硫酸钠根据团，纠正了其水可溶性并减轻了其膜很透亮性，所以可将其应用在体细胞外球蛋白的化学交联。SDAD 和Sulfo–SDAD 的距离臂中还含全是个二硫键，可被呈现剂剪截。

实用NHS–Diazirine通过内部内和内部外淀粉酶的光发应性交联要想证实食用SDA化学试剂将内部内球蛋白软型体通过光化学反应性交联，自己的检测了HeLa肿瘤细胞含有关早前内吞体抗原1(early endosome antigen, EEA1）核蛋白质的核蛋白质完美用处。EEA1顺利通过打卷槽式结构特征域(coiled coil domain) 确立同源二聚体，搭配到磷脂囊泡上, 参于内吞体的运输车。肿瘤细胞用繁多NHS-Diazirine双重性物孵育再用紫外光光净化处理。然后呢将体细胞裂解并举行SDS–PAGE分折，使用的抗EEA1表面抗原实行Western blotting 概述。泄露于紫外光线后，EEA1迁徙率大大减少的的方式仅在SDA和SDAD正确操作的合格品中检查测量到，而在虚拟仿真正确操作比对合格品中未检查测量到（如下图所示）。

NHS-ester diazirine 热塑系统。在pH 数值为7-9 的缓解液中，NHS ester 与伯胺基团（-NH2）**想法建成保持稳定的酰胺键并宣泄NHS。实用长波UV紫外线光（330-370）光亲水性双吖丙啶成型有亲水性的碳烯后面体。这类的后面体使用进第一步化学反应与使用连续臂大小长度上的多种胺基酸侧链或肽段骨架成型共价键。

致使EEA1是上皮神经元内核蛋白混合体，它不用被不透上皮神经元膜的Sulfo–SDA交连。不仅而且，极具更低转至率的、SDAD–热塑的EEA1可被还原系统剂二硫苏糖醇（dithiothreitol, DTT）在区间臂内、剪切。关键在于描述细胞系膜核蛋白化学交联，各位相对了操作可逆性的磺化的N–羟基虎珀酰亚胺–双吖丙啶（Sulfo–SDAD），磺化的苯基叠氮化物交连剂（sulfonated phenyl azide, Sulfo–SANPAH）或同源双能力N–羟基硫代虎珀酰亚胺酯（BS3）治理体细胞后异二聚体钠/钾（Na/K）ATPase 的交连现状。检样采用BCA球蛋白酶按量法的规范化的球蛋白酶水分含量，还有选用抗GAPDH的抗体阳性在线检测以得出结论等量上样。露出于红外光谱线后，根据Western Blotting观查，适用Sulfo–SDAD处置的原材料比采用Sulfo–SANPAH或BS3外理的样品英文比较明显具有着很多的细胞核表明Na/Kβ链化学交联物质。

NHS-Ester Diazirine（SDA）交连剂在细胞膜内交连EEA1 血清符合体。HeLa 上皮细胞（2×106） 在PBS 常用1mM 的SDA，Sulfo-SDA，LC-SDA 或SDAD 标注10 30分钟。未现象的NHS ester 用终含量100mM，pH8.0 的Tris•HCl 淬灭5 20分钟，而后用PBS 洗衣。NHS-diazirine 标记图片的生殖细胞和仿真处里對照在PBS 中运行Stratalinker2400 在365nm 处UV紫外光线强光照15 分鐘，距为4cm。UV紫外线灭菌灯线外理后，裂解神经细胞抽取核蛋白，利用BCA 球血清一定量采血管盒分折总球血清盐浓度。不光的重新的SDAD处里产品的样品（-DTT）之中，每家土样取10μg 融入展现性样件降低液，用SDS-PAGE 做出分离法。数据实用抗EEA1 免疫抗体依据Western blot 参与具体分析。

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