酶与表面抗原热塑的做法有众多种，会按照酶的结构特征不一样可用到不一样的做法。在配制 HRP组合物，可戊二醛二基本要领和过碘酸钠发。更是以筒易过碘酸钠法变得更加最常见。
戊二醛二基本要领
1、方式:戊二醛为的双特点化学药品，用其醛基区分与酶和免役抗体球球淀粉酶上的氨基共价切合，变成酶—戊二醛—免役抗体球球淀粉酶切合物。
2、标记符号方法流程
(1）称取HRP25mg混溶12.5mL/L戊二醛硫酸铜溶液中，于高温静置住宿。
(2)不良反应后的酶液体经SephadexG-25层析柱,用女性生理食盐水过柱。风速掌握在1mL/min，自身棕的流黑液。如重量以上5mL，则以PEG浸提至5mL。放25mL小烧杯里，变慢搅匀。
(3）将待标记符号的抗体阳性112.5mg用生理学淡盐水稀释溶解至5mL，绞拌下逐滴入入酶水溶液中。
(4）用1M pH9.5碳酸盐降低液0.25mL，持续攪拌3~4时间。
(5）加0.2M 赖氨酸0.25mL，混匀后，置在常温2每小时。
(6）在搅伴下逐加入适量入等体型达到饱和状态浓盐酸铵，置4℃1个钟头。
(7） 3000rpm/min抽滤 30min，弃上清。沉定物用半趋于稳定硫酸钠铵洗2次，后面沉定物易溶于大量0.15M、pH7.4的PBS中。
(8)将下列盐溶液装进透析袋中，对0.15M、pH7.4的PB响应液透析，祛除铵阴阳离子后(用萘氏微生物培养基查测)，10000rpm/min离心式30min祛除沉垫，上清液就是指酶联系物，预包装后，冷冻保留。
3、結果辨别
(1）判定及效价旋光度的测定:用特女性朋友抗原(或抗原）同酶标出抗原(或抗免疫力球蛋清抗原)作双边琼脂粘附检测或免疫系统电泳试验装置。进而用酶的底物使沉淀物弧显色，可逐项认定其活性氧。之后以会ELISA(或真正的实验所体系里)对酶组合物展开滴定（见(三）岗位密度的的选择)。
(2）继承法标志流程是比较简洁，相似性好，劣势是酶的采用率低，普通就2%~4%的酶与球蛋白质含量紧密结合。
4、化学药品和用具
( 1)0.1M、pH6.8聚磷酸盐响应液(PBS):取0.2M Na2HPO4 49mL ,0.2M NaH2PO4 51mL,NaCl 1.8g，加减压去离子水至200mL。
(2) 12.5mL/L戊二醛液:取250mLL戊二醛50mL与 pH6.8的PBS确? mL搅拌。
(3) 1M、pH9.5碳酸盐抗震液(PBS):取 1M Na2CO3 3mL与1M NaHCO3 7mL混后。
(4) 0.2M赖氨酸盐溶液:称赖氨酸29.2mg溶水0.01M、pH9.5碳酸盐减慢液1mL中。
(5) 0.15M、pH7.4的PBS及生理学淡盐水。
(6） pH7.8过剩状态氢氧化钠铵过剩盐溶液及半过剩状态氢氧化钠铵过剩盐溶液。
(7） 萘氏化学制剂及聚乙二醇(PEG、MW2000)
(8）纯化的特喜欢的人抗体阳性或抗lg免疫抗体。
(9）HRP(RZ>3.0)。
(10）SephadexG-25层析柱（2cmX50cm)。
(11）搅拌设备器、分光光度计、离心式机。
(12）透析袋、尺寸烧杯，试管，吸管等。
筒易过碘酸钠法
刑法是以NaIO4先将HRP表明的含糖子脱色成醛基,其次再与lg上的氨基相构建,所获酶标注表面抗原的产出率高,已近70%的HRP和Ig 通过,99%的Ig 与酶数集,酶与Ig的化学活化无重大项目毁损,是现有最应用的措施.
1、方式:**的过碘酸钠法中需用二硝基氟苯封闭式管理HRP上残存的a-和e氨基以杜绝酶大分子之間的化学交联。马上又Wilson等起用在低 pH下使NalO4防氧化HRP，最终得以免去了了二硝基氟苯密闭HRP关键步骤。HRP经NaIO4空气氧化后建成的醛化酶可与抗体阳性大分子的氨基相邻，建成斯夫氏碱，后面一种可进步用兵NaBH(或乙酸乙酯胺）重置制成相对稳定的酶标出抗体阳性。
2、箭头关键步骤
(1）称取5mgHRP降解于1mL分馏水面。
(2）于上液中放入0.2mL新配的0.1M NaIO4盐溶液，在常温下背光搅拌器20几分钟。
(3）将下列饱和溶液倒入透析袋，对1mM, pH4.4的冰醋酸钠加载液透析，4℃一晚。
(4）加20pL 0.2M pH9.5碳酸盐缓冲器液，使大于醛化物的pH上升到9.0~9.5，第二随时加入到10mglgG，空调温度遮光猛地搅拌机21天。
(5）加0.1mL新配的 4mg/mL NaBH4液，混匀，再置4℃2小时英文。
(6）将上述所说盐溶液装进透析袋，对0.15M,pH7.4PBS 透析，4℃過夜。
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