阶段销售市场上因为酶底物加测策略一般是显色陪养基法和荧光加测法。此文自动合成没事种复合型半乳糖酶底物1，是可以能够与液相色谱联用系统来迅速的监测病原微生态学。酶底物1的合成视频路经如同1如下图所示,以五乙酰半乳糖2为食材,经溴代,亲核替代、呈现和脱爱护等5步设计反馈，总成品率为56.1% ,高产出率高采用性实现总体目标酶底物。

图1酶底物1提炼线路。

进行实验

实验操作方法

步聚一：1-溴-2,3,4,6-O-四乙酰基-3-D-半乳糖2的镶嵌

步凑二：2,3,4,6-O-四乙酰基-1-O-(4-甲酰基苯氧基)-3-D-半乳糖3的生成

步聚三：2,3,4,6-O-四乙酰基-1-O-(4-羟甲基苯氧基)-B-D-半乳糖4的聚合

关键步骤四：半乳糖缀合物5的提炼

工作步骤五：半乳糖苷酶底物1的自动合成

可是与计划方案

该酶底物1可被微生态学代谢分泌的半乳糖酶水解反应，遭受破裂糖苷键散出出苷元a。苷元a化学上的质地很不平衡,在减慢液中会组织断裂现象释挥发来出一个子二甲胺、二空气氧化碳和4-羟甲基苯酚,其油脂水解原因所示2图示。二甲胺在空调温度为有带氨味的实验室气体,应该通过与气态检查测量仪如气相色谱分析仪色谱联用应该迅敏检测酶底物的淀粉水解最新,然后能进一歩趋势为微生物的检测体的检测科技。

在自动合成阶段中,对化学物质4的合出策略展开了系统优化,显示主要采用LiAIH副货物较多,KBH普遍存在反响不基本情况，只能有NaBH4和THF指标体系不良反应作用非常好。氧化物5的分解具体步骤中,曾应用固态三光气做好偶联碱化生化试剂,将二甲胺和单质4偶联,看到不良反应抑制较难，就会大量的副产品加工，成品率只剩下28%。故使用二甲氨基甲酰氯为发应实验试剂,产出率小涨幅优化,劳动生产率敢达82%。便是,下面有关报道了一大种新款半乳糖糖苷酶底物的分解成办法,用价廉多见的五乙酰半乳糖为起止原辅材料,完成五步充分分解成不良反应得出工作目标代谢物,总产出率高达hg56.1%。转化成方案都具有进行方便,成品率高和首选性强等优点和缺点,并对半乳糖苷酶底物1的蛋白质水解生理机制来了一起探讨,其有关海洋生物探测要素将亟待进步研发。

图2 半乳糖苷酶底物的电离。

Ac-IETD-R110

Ac-DEVD-AMC

2',7'-二氯荧光素二乙酸酯

Dihydrorhodamine 123, dihydrochloride salt

二氢若丹明123

二氢乙锭

CF640R Tyramide

CF594 Tyramide

CF568 Tyramide

CF543 Tyramide

CF488A Tyramide

CF350 Tyramide

Biotin-XX Tyramide

2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine

氯化硝基四氮唑兰

4-甲基伞形酮磷酸二钠盐三水

MUP, free acid

1, 6-二磷酸单糖钠

Chromogenic Phosphatase Substrate Sampler

5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯对甲苯胺盐

BCIP Red

BCIP Pink

XTT 钠盐

Resorufin (high purity)

Resazurin, Sodium Salt

噻唑蓝

2,3-二(4-甲基苯基)-1H-四唑-3-鎓-5-甲腈氯化物

5-溴-4-氯-3-吲哚-Β-D-纤维板二糖糖苷

zl 02.03