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叶酸靶向修饰纳米红细胞膜包裹阿霉素FA/PEG-DOX-Nano-RBCs(纳米药物递释系统)

发布时间：2021-01-29 作者：axc 分享到：

西安杏彩体育平台生物科技有限公司是一家集工业生产，分子生物、生化试剂、常规试剂、常用耗材与进口试剂代理生物科研公司，杏彩体育平台生物拥有一站式实验室采购服务能力，产品链供应完备，涉及有机金属试剂、常用生化试剂、分子生物学试剂、分子生物学领域等相关产品、现我们提供定制产品备孕叶酸靶向治疗遮盖奈米红神经元膜包囊阿霉素FA/PEG-DOX-Nano-RBCs设备，将化学合成方式整理下列：

本研究采用低渗裂解法及纳米挤出工艺，制备了叶酸和聚乙二醇共同修饰的纳米红细胞膜药物载体，并以此负载盐酸阿霉素构建了一种具有长循环和药物靶向双重作用的新型纳米**递释系统（FA/PEG-DOX-Nano-RBCs）。该载药系统利用了红细胞膜的生物相容性， PEG 长循环作用及叶酸配体的**识别靶向特性，有望提高阿霉素的抗**药效，降低其毒副作用， 

FA/PEG-DOX-Nano-RBCs的化学合成流量图下列图如图是1如图是,其具体实施运行过程中下列:

（1）压积红肿瘤细胞的抽取

大鼠眼圈静脉注射丛取全血,4000 rpm离心分离力10min弃去血浆和白组织细胞核层，申请加入4倍体型大小预冷的 PBS水溶液有力吹打，4000rpm离心分离力10min弃上清，兼具复可以达到的操作3次，得见压积红组织细胞核。

（2）血影红血球系（ghost）的备制

取1mL 压积血小板系，倒入4倍质量分数太低渗0.25×PBS 硫酸铜水溶液4 ℃孵育20 min （5 min 上下左右倒置做次），6000rpm 抽滤10min，弃上清，再倒入4倍质量分数太低渗PBS硫酸铜水溶液重复多次洗涤是直到上清透明，制取血影血小板系。

叶酸片配体掩盖环节配制

取同样体积大小PBS配置的FA-PEG-DSPE 以 mPEG-DSPE液体下载上述内容制取的血影神经细胞膜中，于37℃摇床周边孵育1h，4000rpm离心法5min消除解离FA-PEG-DSPE及mPEG-DSPE，冶炼金属备孕叶酸及PEG突显后的血影红神经细胞膜。

（4）FA/PEG-DOX-RBCs的制取

取1mL经备孕叶酸突显的血影红人体细胞，参与4倍质量某种含量的DOX（不溶0.25×PBS）稀硫酸， 4℃生活条件下振摇孵育30min，参与统计质量的10×PBS萃取液，制冷振摇孵育90min。 6000rpm 抽滤10 min，弃上清，用 PBS 稀硫酸洗滌三四次，更加充分弃去分散 DOX，参与 4 倍质量PBS稀硫酸，混匀，能够得到 FA/PEG-DOX-RBCs混悬液。

(5)FA/PEG-DOX-Nano-RBC的制备

取所诉制取的 FA/PEG-DOX-RBCs 混悬液 5 mL，中药用 20%最大功率温度探头多普勒彩超5min，第二选择脂质一挤法使其分别根据 800 nm、 400 nm、 200 nm、 100 nm 内径的聚碳酸酯膜 21 次，得到 FA/PEG-DOX-Nano-RBC 混悬液。将FA/PEG-DOX-Nano-RBC 混悬液放置在 5 mL 反渗透装置离心分离分离力管径， 6000 rpm离心分离分离力 10 min，甩去解离 DOX，将反渗透装置离心分离分离力后取到的 FA/PEG-DOX-Nano-RBC 自己浮悬于 PBS硫酸铜溶液中， 4 ℃遮光保存于保鲜柜中应急。