脂肪堆积聚集巨噬肿瘤细胞源头的外泌体miRNA可在体内和体外调节胰岛素敏感性
检验巨噬上皮细胞可否分泌量miRNA:
(1)小室實驗
主要用于证明书外泌体从供体肿瘤内部缓解压力后,能送达多巴胺多巴胺受体肿瘤内部,且外泌体以其它身上的货品均能被多巴胺多巴胺受体肿瘤内部获取。将Cy3标记图片miR-233 mimic的转染进骨髓源性巨噬体细胞(BMDMS),第二锻炼于Transwell的上室,下室就是展现Cy3标记的3T3-L1脂肪多上皮细胞。共培植12h后,在下室中分析得蓝色荧光的Cy3-miR-233,是共提升前的6倍,表达这俩种血细胞间产生一类媒质起了运输管理miRNA的的作用(图1)。在较实践中,人们用Cy3专门处理(不与miR-223组合)进行处理BMDMs,在与许多BMDM共教育培养12几小时后,显示这样的荧光颜料在BMDMs中的出显可移除不记,在3T3-L1皮下脂肪人体细胞中如果没有颜料显示(图2)。对此,我认为巨噬内部都可以外分泌内部外miRNA,这些食品被摄取量到蛋白质生殖细胞中。
鉴定费ATM能否分泌外泌体:
方便验证碳水化合物团队巨噬上皮细胞(ATM)是否可以外泌体,从肥胖野生型小鼠的内脏脂肪组织(VAT)中分离出脂肪组织巨噬细胞(ATM)(CD11b+F4/80+),并培养72小时,电子显微镜(图4)和纳米观察分析(图5)显示,通过超速离心分离的颗粒含有丰富的ATM分泌的胞外小泡,其直径为30-100 nm。这些EV的密度梯度超速离心分析证实,它们主要由Exos组成,通过外体特异性蛋白标记物TSG101、syntenin1、CD63等的表达得到证明,主要以图6表示。
图3. 高速超速离心力分離外泌体
图4.电镜观察外泌体**杯状囊膜结构
图5.NTA分析外泌体的粒径和浓度表征
图6.Westernblot鉴定TSG101等外泌体蛋白标志物
好产品现货供应:胞外囊泡/细胞微粒/微囊泡/外泌体/EVs/exosomes
41860种蛋白质、2838种microRNA、3408种mRNA
外泌体中含RAB4, RAB5和 RAB11,RAB7 和 RAB9
热休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90
上面產品仅用以科研管理,没法用以人体人体校正!wyf 01.11